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TPOR(Ligand Dependent) 32D

CBP74293

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I. Background

      血小板生成素(TPO)是巨核細胞生成的主要細胞因子調節(jié)因子,通過其特異性細胞 表面受體 MPL 起作用。缺乏 TPO 或 MPL 的小鼠在穩(wěn)態(tài)下產生約 10% 的正常巨核細胞和 血小板,并且在骨髓(BM)移植或細胞毒性藥物等應激下血小板的恢復減弱。MPL 信號 轉導在維持正常的造血干細胞(HSC)數(shù)量和活動方面也起著重要作用。除了刺激巨核生 成外,TPO 還可以單獨或與其他細胞因子(包括 GM-CSF、IL3、IL6、IL11、SCF、FLT 配 體、FGF 和 EPO)聯(lián)合支持造血干細胞和 MK 祖細胞的存活和擴增。

      TPO 與其特異性受體 Mpl(TPOR)蛋白結合,觸發(fā) Jak2 的激活和受體的磷酸化, Tpo/Mpl 激活的主要信號級聯(lián)反應包括 JAK/STAT、PI3K-Akt 和 Ras-MAPK1/3 通路。

 
II. Description

      32D(小鼠原 B 細胞)的生長和增殖需要 IL-3 的維持。通過引入各種表達激酶的基因, 能作為 32D 的驅動基因,讓 32D 不再依賴 IL-3 而增殖,進而激酶基因成為 32D 增殖依賴 的驅動基因,用于評估小分子藥物對激酶的靶向抑制作用,原理及流程見下圖所示。


 

Figure 1. TPOR(Ligand Dependent) 32D 細胞模型原理圖

 
III. Introduction
Expressed gene: TPOR
Stability: 32 passages (in-house test, that not means the cell line will be instable beyond the passages we tested.)
Freeze Medium: 90% FBS+10% DMSO
Culture Medium: IMDM + 10% FBS + 1μM Eltrombopag
Mycoplasma Testing: Negative
Storage: Liquid nitrogen
Application(s): Binding Assay,FACS
 
IV. Representative Data


Figure 2. WB of TPOR(Ligand Dependent) 32D.



Figure 3. CTG Proliferation Assay of TPOR(Ligand Dependent) 32D (C9).


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