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GPR84 β-Arrestin CHO

CBP71596

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I. Background
      GPR84 是一種在巨噬細胞和中性粒細胞等髓系免疫細胞中高表達的 A 類 GPCR,正常 狀態(tài)下表達水平較低,但在脂多糖(LPS)或促炎細胞因子刺激下顯著上調,被視為連接 脂肪酸代謝與先天性免疫應答的關鍵節(jié)點。GPR84 的內源性配體主要為碳鏈長度 C9-C14 的中鏈脂肪酸(以癸酸和月桂酸為代表),合成激動劑 6-OAU 和 DL-175 常用于實驗研究。 在信號轉導層面,GPR84 主要通過偶聯(lián)抑制性 G 蛋白(Gi/o)發(fā)揮功能:活化后抑制腺苷 酸環(huán)化酶、降低胞內環(huán)磷酸腺苷(cAMP)水平,同時其釋放的 Gβγ亞基可激活磷脂酶 C (PLC)、磷脂酰肌醇 3-激酶(PI3K)及絲裂原活化蛋白激酶(MAPK/ERK)通路,最終 促進 TNFα、IL-6 等促炎因子釋放,并增強中性粒細胞的趨化、黏附及活性氧產生,從而 在炎癥性腸病、器官纖維化和代謝綜合征等病理過程中發(fā)揮促炎推動作用。
 
II. Description
      GPR84 β-Arrestin CHO 報告基因藥靶模型很好的模擬了體內 GPR84/β-Arrestin 的信號轉導過程,原理見下圖所示。當缺乏配體刺激時,β-Arrestin 不與 GPR84 結合,融合β- Arrestin 的熒光素酶處于失活構象,當 GPR84 遭遇配體刺激時,融合熒光素酶報告基因的 β-Arrestin 被招募,使熒光素酶報告基因處于激活狀態(tài),加入其底物后發(fā)光信號增強。



Figure 1. 
GPR84 β-Arrestin CHO 細胞模型原理圖
 
III. Introduction
Expressed gene:

GPR84

Host Cell:

CHO

Stability: 32 passages (in-house test, that not means the cell line will be instable beyond the passages we tested.)
Freeze Medium: 90% FBS+10% DMSO
Culture Medium: F12K+10%FBS +5 μg/ml Puromycin +5 μg/ml Blasticidin
Mycoplasma Status: Negative
Storage: Liquid nitrogen immediately upon delivery
Application(s):

Functional assay for GPR84 Receptor

Assay Format: β-Arrestin
 
IV. Description of Host Cell Line
Organism: Hamster
Tissue: Ovary
Morphology: Epithelial
Growth Properties: Adherent
 
V. Representative Data

Figure 2. Dose Response of Agonists in GPR84 β-Arrestin CHO(C48).
 

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