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FLT3-ITD [I836del]/BaF3

CBP73243

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I. Background

      FLT3-ITD 基因是 FLT3 基因的一種突變形式,屬于 FMS 樣酪氨酸激酶家族,位于人類 13 號染色體長臂(13q22.2)。該基因編碼的蛋白是一種跨膜受體蛋白,屬于 III 型受體酪 氨酸激酶(RTK)家族成員,在造血細(xì)胞的生長、增殖和分化中發(fā)揮關(guān)鍵作用。

      FLT3-ITD 突變是 FLT3 基因近膜結(jié)構(gòu)域的內(nèi)部串聯(lián)重復(fù),通常發(fā)生在 14/15 號外顯子 上,插入的重復(fù)序列長度一般 3-400 bp 不等,且總是以三倍的倍數(shù)出現(xiàn),保留轉(zhuǎn)錄本的閱 讀框。這種突變導(dǎo)致 FLT3 蛋白在無配體結(jié)合的情況下發(fā)生二聚體化并持續(xù)自我磷酸化, 增強(qiáng)激活酪氨酸激酶活性,使得下游信號通路(如 RAS/MAPK、PI3K/AKT 等)持續(xù)激活, 導(dǎo)致細(xì)胞增殖失調(diào)。

 
II. Description

      BaF3(小鼠原 B 細(xì)胞)的生長和增殖需要 IL-3 的維持。通過引入各種表達(dá)激酶的基因, 能作為 BaF3 的驅(qū)動基因,讓 BaF3 不再依賴 IL-3 而增殖,進(jìn)而激酶基因成為 BaF3 增殖依賴的驅(qū)動基因,用于評估小分子藥物對激酶的靶向抑制作用,原理及流程見下圖所示。
 



Figure 1. 
FLT3-ITD[I836del] BaF3 細(xì)胞的構(gòu)建原理圖

 
III. Introduction

Cell Line Name:

FLT3-ITD [I836del]/BaF3

Host Cell:

Ba/F3

Stability: 32 passages (in-house test, that not means the cell line will be instable beyond the passages we tested.)

Application:

Useful for the study of enzyme kinetics, screening inhibitors, and selectivity profiling.

Freeze Medium:

90% FBS+10% DMSO

Complete Culture Medium:

RPMI-1640+10% FBS+2 μg/ml Puromycin

Mycoplasma Status:

Negative

 
IV. Representative Data

1.WB of FLT3-ITD [I836del]/BaF3


Figure 2. WB of FLT3-ITD [I836del]/BaF3.

2. Sanger of FLT3-ITD [I836del]/BaF3


Figure 3. Sanger of FLT3-ITD [I836del]/BaF3.

 

3. Anti-proliferation assay

Figure 4. CTG Proliferation Assay of FLT3-ITD [I836del] BaF3(C1).

 

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